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多肽常识

2016年4月15日 19:13
多肽常识
多肽保存
    多肽一般长期保存需要避光保存,并应保存在-20度以下,短期可以保存在4。可以短时间以室温运输。多肽在-20很稳定,特别是冷冻干燥并保存在干燥器中时,在将它们暴露于空气之前, 冷冻干燥多肽可以放于室温自然升温,这将使湿度影响减少,当无法冷冻干燥时,最好的方法是以小的工作样量存放。
    对于含Cys, Met or Trp的多肽,脱氧缓冲剂对其溶解必不可少,因为这种多肽容易空气氧化, 在封瓶前,氮气或氩气保护会降低氧化作用。含GlnAsn的多肽比较容易降解,所有这些肽与不含这些有问题的简单肽相比,保存期要短。

多肽溶解
    溶解多肽是非常复杂的事情,一般很难一下子确定合适的溶剂。通常是先取一点试验,在没有确定合适的溶剂前千万不要全部溶解。
    下列方法有助于您选择合适的溶剂:
(1) 判定多肽的电荷特定,设定酸性氨基酸Asp(D),Glu(E)CCOOH-1;碱性氨基酸Lys(K),Arg(R),His(H)NNH2+1,其它氨基酸的电荷为0。计算出将电荷数。
(2) 如果净电荷数>0,多肽为碱性,用水溶解:如果不溶解或溶解性不大,加入醋酸(10%以上);如果多肽还不能溶解,加入少量TFA(25ul)溶解,然后加入500ul水稀释。
(3) 如果净电荷数<0,多肽为酸性,用水溶解;如果不溶解或溶解性不大,加入氨水(25ul)溶解,然后加入500ul水稀释。
(4) 如果净电荷数=0,多肽为中性,一般需要用有机溶剂如乙腈,甲醇或异丙醇,DMSO等溶解。还有人建议需要尿素来溶解疏水性很大的多肽。